Para su quinta novela, publicada el 8 de abril de 1957, Ian Fleming dio un giro radical a la estructura narrativa de la saga; por primera vez, el enemigo no reacciona ante Bond, sino que lo convierte en objetivo desde la primera página. La inspiración vino de su fascinación por el ajedrez como metáfora de la Guerra Fría, y de su conocimiento directo de cómo operaban los servicios de inteligencia soviéticos, cuya metodología fría y calculada admiraba casi tanto como temía. Fleming quería escribir una novela donde la amenaza fuera invisible hasta que ya era demasiado tarde, donde el peligro no viniera de un villano que Bond persigue sino de una trampa elaborada con precisión matemática en torno a él.
"Desde Rusia con amor" es considerada por muchos la novela más sofisticada de toda la saga, y fue personalmente la favorita de Fleming, quien llegó a incluirla en la lista de libros que se llevaría a una isla desierta.
James Bond (007) — Agente del Mi6 elegido por SMERSH como objetivo específico de una operación de desprestigio y eliminación, enviado a Estambul para recoger a una supuesta desertora soviética sin saber que camina directo hacia una trampa.
Tatiana Romanova — Agente del servicio de inteligencia soviético reclutada por Rosa Klebb para actuar como cebo. Su misión es seducir a Bond y fingir querer desertar, aunque ella misma ignora los verdaderos y letales alcances del plan en el que participa.
Rosa Klebb — Una de las grandes villanas de toda la saga. Coronel de SMERSH, fría, despiadada y meticulosa, es la arquitecta operativa de la trampa contra Bond. Su imagen y su zapato con cuchilla envenenada se convirtieron en iconos del género.
Donovan "Red" Grant — El asesino principal de SMERSH, físicamente imponente y psicológicamente perturbador. Sigue a Bond desde las sombras a lo largo de toda la novela hasta el enfrentamiento final en el Orient Express, uno de los más memorables de la saga.
Kronsteen — Maestro del ajedrez y estratega de SMERSH, el cerebro intelectual detrás del plan. Su concepción de la operación como una partida de ajedrez es el hilo conductor de toda la trama.
Kerim — Jefe de la estación del MI6 en Estambul y aliado de Bond sobre el terreno. Carismático, astuto y profundamente conocedor del mundo otomano, es uno de los personajes secundarios más queridos de toda la saga literaria de Fleming.
M — Jefe del MI6, quien recibe el informe sobre la supuesta desertora soviética y ordena la misión de Bond hacia Estambul, cayendo sin saberlo en el esquema de SMERSH.
René Mathis — Agente de la inteligencia francesa y aliado recurrente de Bond, presente en el tramo final de la novela en París.
General G — Alto mando de SMERSH que autoriza y supervisa la operación contra Bond, representando la cúpula de la inteligencia soviética detrás de toda la conspiración.